1　材料和方法

1. 1材料

　　收集本院于1988/1998 年间经手术及病理证实的儿童髓母细胞瘤手术标本, 对其中在显微手术全切的基础上且术后系统放疗并有随访资料完整( 1～10 a) 的 84例标本进行生物学特性研究. 按生存期 3, 5, 10 a 分为 A, B, C 3 组.标本经常规 40mL·L- 1福尔马林固定, 石蜡包埋, 切片及HE染色.

1. 2免疫组化方法

　　组织切片经微波处理后, 对胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、 突触素( Syn) 、 p53 蛋白、 血管内皮细胞生长因子(VEGF) 、 增殖细胞核抗原(PCNA ) 免疫组化标记. 采用标准ABC三步法染色.

1. 3进行结果判断

　　GFAP 和 Syn 以细胞内或细胞突起中出现棕黄颗粒为阳性反应.p53 蛋白以核内出现棕黄色颗粒或均质的黄染为阳性, 阳性细胞比例大于 10. 0%定为阳性.VEGF 按 5. 0%以上细胞 质或细胞膜 呈棕黄色染色 者为VEGF 蛋白表达阳性.PCNA 以核内出现棕黄色颗粒为阳性,在切片和不同方法选取 16 个高倍视野, 用图像分析仪计数阳性细胞的百分率, 即标记指数(lablling index, LI).

2　结果

2. 1组织病理学观察

　　髓母细胞瘤由未分化小细胞构成, 细胞核染色深, 核分裂相多见, 形态上可向各种细胞过渡, 向神经元过渡的髓母细胞瘤可见Homer-Wright 菊形团或核大而园, 有明显核仁的大细胞, 向神经胶质过渡的细胞核呈长园形, 胞质增多, 出现双形或多极突起. 在 84 例中, 有 56例髓母细胞瘤既向神经元又向神经胶质分化(66. 7%) . 12 例向神经元分化, 16 例向神经胶质分化.

2. 2免疫组化染色结果

　　其中免疫组化标记显示有 66. 7%的 病例同时表达神经元标志物( Syn) 和神经胶质标 志物(GFAP) , 表明髓母细胞瘤具有向神经元和神经胶质双向分化的特点(T ab 1) .

3　讨论

　　本研究发现, 66. 7%的病例可同时表达 Syn 和GFAP 这与 Gonld等的观察结果相一致.Syn既可见于幼稚的神经细胞又可见于成熟的神经细胞. Sidransky 等发现, 脑胶质瘤的发展与 p53 突变细胞的克隆增殖有关. 我们结果为57. 6%～60. 0%. 证实了这一点. 但p53 的表达, 与其 A,B,C组间生存期无显著差异( P> 0. 05). 这可能与髓母细胞瘤是一种原始未分化的肿瘤有关.

　　本组研究在儿童髓母细胞中生存期为 3 a 的 VEGF 表达为 73. 8%, 5 a 生存期为 63. 8%, 10 a 生存期仅为 40. 0%, 因此推测 VEGF 在促进肿瘤的生长的同时也促进了肿瘤的浸润转移. PCNALI 的研究结果也显示, 生存期为 3, 5 及 10 a 的PCNALI 为(89. 7±6. 83) , ( 43. 6±16. 2) , ( 28. 6±13. 7) , 相差同样显著( P< 0. 01), 与 VEGF 结果一致, 而 PCNA 作为DNA 聚酶的辅助蛋白直接参与了细胞增殖过程中 DNA 复制, 其含和表达程度反映了细胞的增殖活性. 因此,VEGF和 PCNA 反映了髓母细胞瘤的恶性程度即有高度的浸润性和极易转移性. 可作为反映儿童髓母细胞瘤预后的生物学作为指标。

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